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CY7.5-Cytochrome-C，CY7.5標(biāo)記細(xì)胞色素C的合成步驟概述

CY7.5-Cytochrome-C 是通過將細(xì)胞色素 C（Cytochrome C，一種含血基質(zhì)鐵的蛋白質(zhì)）與近紅外熒光染料 CY7.5 偶聯(lián)形成的標(biāo)記蛋白。該標(biāo)記分子在化學(xué)研究、蛋白質(zhì)動力學(xué)分析及藥物遞送研究中具有重要作用。

合成步驟概述：
蛋白質(zhì)預(yù)處理
將 Cytochrome-C 溶解于適宜的緩沖液（如 PBS pH 7.2–7.4）中，保證蛋白質(zhì)穩(wěn)定性。
若蛋白質(zhì)含有自由巰基，可選擇保護(hù)或活化處理，避免副反應(yīng)。
CY7.5 熒光團(tuán)活化
CY7.5 常以 NHS 酯、Maleimide 或其他活化形式存在，能夠與蛋白質(zhì)的氨基或巰基發(fā)生共價反應(yīng)。
活化染料需在暗處溶解，并控制溶劑與濃度，保證反應(yīng)效率。
偶聯(lián)反應(yīng)
將 CY7.5 活化染料緩慢加入 Cytochrome-C 溶液中，溫和攪拌反應(yīng)數(shù)小時。
pH 維持在 7–8，避免蛋白質(zhì)變性，同時保證酰胺鍵或硫醚鍵形成。
反應(yīng)時間與染料/蛋白質(zhì)摩爾比決定偶聯(lián)程度，可調(diào)控?zé)晒鈴?qiáng)度與蛋白活性保留。
反應(yīng)終止與穩(wěn)定化
反應(yīng)結(jié)束后，可加入適量羥胺或其他試劑封閉未反應(yīng)的活性酯，避免蛋白質(zhì)交聯(lián)。
維持低溫和緩沖體系穩(wěn)定 CY7.5-Cytochrome-C。
純化步驟
通過透析或凝膠過濾去除未反應(yīng)染料。
可使用離子交換或尺寸排阻 HPLC 進(jìn)一步提高純度。
確保標(biāo)記蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)完整、無聚集。
表征與驗(yàn)證
熒光光譜確認(rèn) CY7.5 偶聯(lián)成功。
紫外-可見光譜和質(zhì)譜分析蛋白質(zhì)與染料的偶聯(lián)效率。
功能實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證 Cytochrome-C 活性及紅氧化還原能力保留。
產(chǎn)品名稱：CY7.5-Cytochrome-C，CY7.5標(biāo)記細(xì)胞色素C
純度：95%+
規(guī)格：mg/g
用途：科研

狀態(tài)：固體/粉末/溶液

推薦產(chǎn)品：

水溶性花菁染料Cy5.5標(biāo)記炔烴 Sulfo-CY5.5-alkyne 2055046-12-1
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水溶性花菁染料Cy5.5標(biāo)記酰肼 sulfo-Cy5.5-hydrazide

僅用于科研，不能用于人體。小編axc