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Cy5-OVA,CY5標記的卵清蛋白的合成步驟
Cy5-PE 是將熒光染料 Cy5 與磷脂酰乙醇胺(PE)通過共價偶聯(lián)形成的功能化脂質(zhì)分子。PE 分子結(jié)構(gòu)中包含疏水的脂肪酸尾部和親水的乙醇胺頭基,其中的胺基提供了與 Cy5 活性衍生物(如 Cy5-NHS 酯或 Cy5-Alkyne)形成酰胺鍵或點擊化學(xué)連接的理想位點。通過此技術(shù),可獲得具有穩(wěn)定熒光信號且在膜體系中功能保持的標記脂質(zhì)。
制備方法通常首先將 PE 溶解于干燥的有機溶劑體系中,如氯仿(CHCl?)、二氯甲烷(DCM)或甲苯,以保證脂質(zhì)完全溶解。為了避免偶聯(lián)反應(yīng)中水分干擾,所有溶劑需脫水并在氮氣氣氛下操作。隨后,加入適量的有機堿(如三乙胺或DIPEA)以激活 PE 的胺基,使其能高效與 Cy5 活性酯反應(yīng)。Cy5-NHS 或 Cy5-炔基溶解于相同溶劑中,并通過滴加方式緩慢加入 PE 溶液,以保證均勻反應(yīng)并減少局部過濃導(dǎo)致的副反應(yīng)。反應(yīng)過程通常在室溫或 30–37°C 下進行,并保持氮氣保護,持續(xù)攪拌 12–24 小時。溫和條件確保 Cy5 分子熒光穩(wěn)定性,同時防止脂質(zhì)氧化或結(jié)構(gòu)破壞。反應(yīng)完成后,混合物通過硅膠柱層析或高效液相色譜(HPLC)分離,以去除未反應(yīng)的 Cy5 和雜質(zhì)。純化后的 Cy5-PE 通常呈紅色粉末或紅紫色油狀物,可溶于有機溶劑或脂質(zhì)體制備體系中。
產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)可通過質(zhì)譜(MS)確認偶聯(lián)成功及標記數(shù)目,通過核磁共振(NMR)分析脂質(zhì)骨架完整性。光學(xué)特性通過紫外-可見光譜和熒光光譜檢測,可定量熒光強度及穩(wěn)定性。制備中可通過調(diào)整 Cy5 與 PE 的摩爾比控制標記密度,實現(xiàn)熒光強度與脂質(zhì)功能的平衡。
產(chǎn)品名稱:Cy5-OVA,CY5標記的卵清蛋白
純度:95%+
規(guī)格:mg/g
用途:科研
狀態(tài):固體/粉末/溶液
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