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Cy3-PTD-HSP27,CY3標(biāo)記熱休克蛋白27的反應(yīng)機(jī)制
Cy3-PTD-HSP27是通過將熒光染料Cy3共價標(biāo)記于融合有蛋白轉(zhuǎn)運肽(PTD)的熱休克蛋白27(HSP27)分子上的復(fù)合物。該標(biāo)記物結(jié)合了PTD的細(xì)胞穿透能力與HSP27的蛋白功能,同時具備Cy3的熒光檢測性能,適用于細(xì)胞生物學(xué)及蛋白研究領(lǐng)域。
反應(yīng)機(jī)制主要基于Cy3染料活性基團(tuán)與蛋白分子特定官能團(tuán)的共價結(jié)合。通常使用的Cy3-NHS酯作為活性試劑,通過酰胺化反應(yīng)與HSP27及PTD序列中賴氨酸殘基的ε-氨基形成穩(wěn)定的酰胺鍵。反應(yīng)條件控制在pH 7.5至8.5的緩沖液中,溫和環(huán)境有利于蛋白保持構(gòu)象,避免功能喪失。
在反應(yīng)過程中,Cy3-NHS酯的羰基碳受到蛋白氨基的親核攻擊,形成四面體過渡態(tài),隨后釋放N-羥基琥珀酰亞胺,完成共價偶聯(lián)。該反應(yīng)效率高,選擇性強(qiáng),能夠?qū)崿F(xiàn)均勻的標(biāo)記分布。標(biāo)記過程中的溫度、時間及染料用量均為影響偶聯(lián)度和蛋白活性的關(guān)鍵因素。
PTD序列的存在提升了蛋白的細(xì)胞穿透能力,使標(biāo)記后的復(fù)合物適合于細(xì)胞內(nèi)功能研究及活性追蹤。Cy3標(biāo)記賦予了蛋白強(qiáng)烈的熒光信號,便于熒光顯微鏡和流式細(xì)胞術(shù)等技術(shù)檢測。標(biāo)記完成后,采用透析或凝膠過濾純化除去未反應(yīng)染料,保證產(chǎn)品純度。
整體反應(yīng)機(jī)制確保了Cy3-PTD-HSP27結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性和功能完整性,使其在細(xì)胞研究、蛋白定位及動態(tài)監(jiān)測中具有良好表現(xiàn)。
產(chǎn)品名稱:Cy3-PTD-HSP27,CY3標(biāo)記熱休克蛋白27
純度:95%+
規(guī)格:mg/g
用途:科研
Cy3-PTD-HSP27是通過將熒光染料Cy3共價標(biāo)記于融合有蛋白轉(zhuǎn)運肽(PTD)的熱休克蛋白27(HSP27)分子上的復(fù)合物。該標(biāo)記物結(jié)合了PTD的細(xì)胞穿透能力與HSP27的蛋白功能,同時具備Cy3的熒光檢測性能,適用于細(xì)胞生物學(xué)及蛋白研究領(lǐng)域。
反應(yīng)機(jī)制主要基于Cy3染料活性基團(tuán)與蛋白分子特定官能團(tuán)的共價結(jié)合。通常使用的Cy3-NHS酯作為活性試劑,通過酰胺化反應(yīng)與HSP27及PTD序列中賴氨酸殘基的ε-氨基形成穩(wěn)定的酰胺鍵。反應(yīng)條件控制在pH 7.5至8.5的緩沖液中,溫和環(huán)境有利于蛋白保持構(gòu)象,避免功能喪失。
在反應(yīng)過程中,Cy3-NHS酯的羰基碳受到蛋白氨基的親核攻擊,形成四面體過渡態(tài),隨后釋放N-羥基琥珀酰亞胺,完成共價偶聯(lián)。該反應(yīng)效率高,選擇性強(qiáng),能夠?qū)崿F(xiàn)均勻的標(biāo)記分布。標(biāo)記過程中的溫度、時間及染料用量均為影響偶聯(lián)度和蛋白活性的關(guān)鍵因素。
PTD序列的存在提升了蛋白的細(xì)胞穿透能力,使標(biāo)記后的復(fù)合物適合于細(xì)胞內(nèi)功能研究及活性追蹤。Cy3標(biāo)記賦予了蛋白強(qiáng)烈的熒光信號,便于熒光顯微鏡和流式細(xì)胞術(shù)等技術(shù)檢測。標(biāo)記完成后,采用透析或凝膠過濾純化除去未反應(yīng)染料,保證產(chǎn)品純度。
整體反應(yīng)機(jī)制確保了Cy3-PTD-HSP27結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性和功能完整性,使其在細(xì)胞研究、蛋白定位及動態(tài)監(jiān)測中具有良好表現(xiàn)。
產(chǎn)品名稱:Cy3-PTD-HSP27,CY3標(biāo)記熱休克蛋白27
純度:95%+
規(guī)格:mg/g
用途:科研
狀態(tài):固體/粉末/溶液
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