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Cyanine5(Cy5)是一種遠(yuǎn)紅色熒光染料,激發(fā)波長(zhǎng)約650 nm,發(fā)射波長(zhǎng)約670 nm,具有極高的亮度、優(yōu)異的光穩(wěn)定性和良好的水溶性,適合深層組織和低背景成像。
四嗪(Tetrazine)是生物正交化學(xué)領(lǐng)域中的重要官能團(tuán),可與應(yīng)變環(huán)烯(如TCO、環(huán)戊二烯)通過(guò)逆電子需求Diels–Alder(IEDDA)反應(yīng)迅速偶聯(lián),反應(yīng)速率高且選擇性極佳,無(wú)需催化劑,兼容生物條件。Me-tetrazine為四嗪的一種甲基取代體,化學(xué)穩(wěn)定性更高,偶聯(lián)效率優(yōu)異。
Me-tetrazine-Cyanine5在生物學(xué)研究中用于特異性標(biāo)記TCO修飾的蛋白質(zhì)、抗體、細(xì)胞表面分子或納米載體。通過(guò)與TCO分子進(jìn)行快速反應(yīng),可實(shí)現(xiàn)活細(xì)胞或固定樣品的高效標(biāo)記與追蹤。其遠(yuǎn)紅色熒光減少了生物自發(fā)熒光干擾,特別適合深層組織成像及多色實(shí)驗(yàn)。
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