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AlexaFluor350 Phalloidin的合成及純化過程
AlexaFluor350 Phalloidin是菲洛毒素與Alexa Fluor 350染料的共價偶聯(lián)產(chǎn)物,專用于高分辨率熒光顯微鏡下神經(jīng)元細胞骨架F-actin的觀察,能夠揭示細胞形態(tài)與動力學(xué)。
合成過程概述:活性染料制備
Alexa Fluor 350以其NHS酯形式提供活性羧基,便于與蛋白質(zhì)或肽類含有的氨基結(jié)合。
菲洛毒素氨基活化
菲洛毒素分子含有可反應(yīng)的伯胺基團,通常存在于賴氨酸殘基側(cè)鏈,作為NHS酯偶聯(lián)的位點。
偶聯(lián)反應(yīng)
將Alexa Fluor 350 NHS酯在緩沖液(pH 7.4–8.5)中與菲洛毒素混合,常溫反應(yīng)數(shù)小時,形成穩(wěn)定的酰胺鍵。該過程需在無光條件下進行,以避免染料光降解。
純化步驟
通過高效液相色譜(HPLC)分離未反應(yīng)的游離染料和多余反應(yīng)物,獲得純凈的AlexaFluor350 Phalloidin。純化后的產(chǎn)物以凍干保存,避免水解。
質(zhì)量確認
采用質(zhì)譜(MALDI-TOF或ESI-MS)和紫外-可見光譜驗證標記成功及染料比例。
應(yīng)用優(yōu)勢:
該偶聯(lián)物因其藍光激發(fā)波長(約346 nm)和短波長發(fā)射,適合多色成像實驗,尤其在神經(jīng)細胞內(nèi)復(fù)雜骨架結(jié)構(gòu)的動態(tài)追蹤中發(fā)揮重要作用。AlexaFluor350 Phalloidin提供了高靈敏度、低背景的熒光信號,是細胞骨架研究的重要工具。
產(chǎn)品名稱:AlexaFluor350 Phalloidin
純度:95%+
規(guī)格:mg/g
用途:科研
狀態(tài):固體/粉末/溶液
推薦產(chǎn)品:
sulfo-cy5-nhs
水溶性cy5活性酯
CAS:2408482-09-5
CY7-NHS
菁染料CY7熒光標記活性酯
CAS:3599-32-4
序號 | 新聞標題 | 瀏覽次數(shù) | 作者 | 發(fā)布時間 |
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