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6-FAM(Br4),CAS號(hào) 3561-24-8,全稱 6-羧基熒光素(6-Carboxyfluorescein),是熒光素類染料中的經(jīng)典代表,屬于深紅色有機(jī)熒光染料,因其分子結(jié)構(gòu)上常引入溴(Br4)進(jìn)行衍生化而得名。6-FAM 在水溶液中的激發(fā)波長(zhǎng)約為 495 nm,發(fā)射波長(zhǎng)約為 520 nm,發(fā)出明亮的綠色至黃色熒光,具有較高的量子產(chǎn)率和良好的光穩(wěn)定性。
其分子末端的羧基提供了化學(xué)修飾的活性位點(diǎn),可通過形成酯或酰胺鍵與核酸、肽鏈、蛋白質(zhì)等分子偶聯(lián),常用于構(gòu)建熒光探針、引物、探針雜交實(shí)驗(yàn)以及熒光標(biāo)記的寡核苷酸。
6-FAM(Br4)在分子生物學(xué)領(lǐng)域極為重要,特別是在定量 PCR(qPCR)、測(cè)序、SNP 分析和 FRET 實(shí)驗(yàn)中,被廣泛應(yīng)用于多重檢測(cè)體系。相比于未衍生化的熒光素,溴化修飾可能增強(qiáng)其光穩(wěn)定性或調(diào)整其熒光性能,使其更適應(yīng)高靈敏度檢測(cè)需求。
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