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Sulfo-CY3-DBCO 描述

Sulfo CY3-DBCO（磺酸化CY3-DBCO）

Sulfo CY3-DBCO 是一種水溶性熒光染料，用于銅離子自由的點擊化學反應。它結合了Sulfo-CY3（磺酸化Cyanine 3，激發(fā)波長550 nm，發(fā)射波長570 nm）與DBCO（雙環(huán)辛炔）功能團，后者可與疊氮類物質(zhì)進行快速、特異性的 SPAAC 反應（應變促進的疊氮-炔點擊反應）。由于其磺酸基團增強了水溶性，Sulfo CY3-DBCO 非常適用于在水性體系中標記蛋白、抗體、核酸和多糖類疊氮修飾物。它在細胞標記、活體成像、生物共軛等研究中具有廣泛應用，尤其適合于無需催化劑的生物體系中。

一、基本信息

名稱：Sulfo-CY3-DBCO

中文名稱：磺酸化CY3-DBCO熒光探針

CAS:1782950-79-1

二、物化性質(zhì)

顏色和外觀：紅色至深橙色固體粉末

純度：≥95%（HPLC）

溶解度：*易溶于水、PBS緩沖液、DMSO和DMF

*性：高親水性，因引入磺酸基團和PEG鏈，具有良好水溶性

pH穩(wěn)定性：pH 5.0–9.0 條件下穩(wěn)定

官能團：含DBCO基團（Dibenzocyclooctyne，具有應變?nèi)步Y構），可與疊氮（azide）類分子進行銅離子無催化的點擊反應（SPAAC）

三、光學性能

吸收波長（λabs）：約 550 nm

發(fā)射波長（λem）：約 570 nm

熒光性質(zhì)：高量子產(chǎn)率，信噪比高，適合細胞和組織成像

激發(fā)光源推薦：兼容532 nm 或561 nm激光器

四、儲存條件

儲存溫度：-20°C避光干燥儲存

有效期：至少12個月（密封避光保存）

避免條件：避免反復凍融，避免高溫和強光照射

復溶后使用期限：水溶液中建議4°C避光儲存，1周內(nèi)使用；長期使用可分裝冷凍保存

五、制備簡介

Sulfo-CY3-DBCO 通常通過以下方式合成：

1. 以CY3（Cyanine 3）為基礎染料進行磺酸化修飾（Sulfo）以增強水溶性；

2. 將CY3通過共價鍵連接至一個活性PEG鏈段上（例如NH-PEG-COOH），該PEG鏈段增強其空間位阻和生物相容性；

3. *后引入DBCO基團，通過活性酯（NHS）或羧酸酰胺反應鏈接至PEG端；

4. 成品通過HPLC和質(zhì)譜等方法純化和表征。

六、應用領域

1. 生物正交標記（Bioorthogonal Labeling）

Sulfo-CY3-DBCO 是生物正交反應的典型探針，常用于點擊化學標記疊氮修飾的生物大分子，如：

疊氮標記的DNA、RNA、蛋白質(zhì)或糖類；

熒光示蹤細胞內(nèi)過程；

靶向納米粒子的標記，如疊氮修飾的脂質(zhì)體、聚合物載體等。

2. 活體成像（Live-cell Imaging）

因其不依賴金屬離子（Cu-free），可以用于活細胞或活體動物體系中進行無毒熒光標記，適合：

細胞表面分子追蹤；

納米藥物載體在活體組織中的分布監(jiān)測；

腦血屏障穿透實驗中標記熒光探針。

3. 免疫熒光染色（IF）

可用于原位免疫染色，尤其是用于原位雜交（FISH）或原位RNA成像（RNA-FISH）中的疊氮修飾探針染色。

4. 微陣列與微球編碼

用于高通量微陣列（microarray）或編碼微球中的熒光編碼。

七、相關文獻（中文翻譯與引用）

1. Chen et al., *Bioconjugate Chemistry*, 2020

   > 使用Sulfo-CY3-DBCO對疊氮化肽進行無銅點擊標記，實現(xiàn)了細胞特異性靶向與追蹤。實驗表明該染料在細胞培養(yǎng)液中穩(wěn)定性高，熒光信號持續(xù)時間長。

2. Li et al., *Journal of Nanobiotechnology*, 2021

   > 通過將Sulfo-CY3-DBCO連接至疊氮修飾的納米脂質(zhì)體，實現(xiàn)納米遞送系統(tǒng)的可視化追蹤。研究證實其對細胞毒性*低，適用于動物實驗。

3. Zhou et al., *Frontiers in Chemistry*, 2022

   > 在構建pH響應型智能聚合物探針時，將Sulfo-CY3-DBCO作為熒光標簽，通過SPAAC反應成功連接至疊氮修飾的聚合物主鏈，實現(xiàn)可控釋放下的熒光成像。

八、注意事項

使用前請確保反應體系無游離還原劑（如DTT、TCEP）或銅離子；

本品應在避光條件下使用，以避免熒光衰減；

建議使用HPLC純度的疊氮底物以提高標記效率；

熒光信號可通過常規(guī)流式細胞儀或共聚焦顯微鏡進行檢測。